ICS 65.020.30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T14926.28—2001 代替GB/T14926.28—1994 实验动物 小鼠细小病毒检测方法 Laboratory animalMethod for examination of minute virus of mice (MVM) 2002-05-01实施 2001-08-29发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 2001 GB/T 14926. 28 前 言 本标准是对GB/T14926.28一1994《实验动物小鼠细小病毒检验方法》的修订。对检测方法木作 改动，仅对原标准的个别文字作了修改 本标准由中华人民共和国科学技术部提山并归口。 本标准起草单位：中国实验动物学会 本标准主要起草人：霞琴。 本标准」1994年1川首次发布， I 中华人民共和国国家标准 实验动物 GB/T 14926.28 2001 小鼠细小病毒检测方法 代替 GB/T 11926.28—199:1 Laboratory animal-Method for examination of minute virus of micc (MVM) 1范围 本标准定了小鼠细小病毒(MVM)的检测方法和试剂等。 标准适用于小鼠MVM 的检测。 2引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准巾引用而构成为本标准的条文。本标雅出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T14926.502001实验动物酶联免疫吸附试验 GB/T14926.51—2001实验动物免疫酶试验 GB/T14926.52—2001实验动物免疫荧光试验 3原理 根据免疫学原理，采用MVM抗原检测小鼠血清中MVM抗体。 4主要试剂和器材 4.1 试剂; 4. 1. 1 ELISA 抗原 4.1.1.1特异性抗原 MVM接种小鼠胚(ME)或3T3细胞,加维持液培养7～10 d,当细胞病变达一十十~+十十十时 收获。冻融次或超声波处理后.低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成F1.ISA抗 原。 4.1.1.2正常抗原 ME或3T3细胞冻融破碎后,经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液。 4.1.2抗原片 MVM 接种大鼠胚(RF)或MF细胞、培养7～10 d,病变达十十～十十+时用胰悔消化分散、PBS 洗涤，涂片。室泻下燥后.冷丙酮固定10 min，一20℃保存。 4. 1. 3 阳性血清 MVM抗原免疫SPF小鼠所获得的抗血清。 4. 1. 4 阴性血清 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准 2002-05-01实施 1