ICS07.080 B 47 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3166—2017 家蚕质型多角体病毒检测 实时荧光定量PCR法 Detection of Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus-Real time PCR method 行业标准信息服务平台 2017-12-22发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T3166—2017 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由农业部种植业管理司提出。 本标准由全国桑蚕业标准化技术委员会归口（SAC/TC437）。 本标准起草单位：江苏科技大学、中国农业科学院蚕业研究所、农业部蚕桑产业产品质量监督检验 测试中心（镇江）、苏州大学、西南大学、华南农业大学。 本标准主要起草人：吴萍、郭锡杰、陈涛、贡成良、潘敏慧、李龙、孙京臣。 行业标准信息服务平台 I NY/T3166—2017 家蚕质型多角体病毒检测 实时荧光定量PCR法 1范围 本标准规定了家蚕质型多角体病毒（Bombyamoricytoplasmicpolyhedrosisvirus）的实时荧光定 量PCR检测方法。 本标准适用于家蚕中肠组织中家蚕质型多角体病毒的检领 2 规范性引用文件 PUBL 下列文件对于本文 件的应用是必不可少的。 件。凡是不注日期的 文件 GB/T 6682 规格和试验方法 缩略语 N 下列缩略 语适 BmCPV 家蚕质型多角体病毒（Bombmor polyhedro bp：碱基对( base pai Ct值：每个 的循环数 mRAA CDNA 与 bonucleie DEPC: 焦碳酸乙酯（die bonate) dNTPs：脱拿 氧核苗 铁磷酸花合 yribonu idetripho 四种脱氧核糖核 CEN 苷酸dATP、dT PCR：聚合酶链式反应（polymerasechal reaction 4原理 根据BmCPV 多角体蛋白 的保守序列设计特异性PCR引物进行 反应。利用荧光信 号伴随目的PCR产物的增加增 根据e 值判断 质型多角体病毒。 5试剂与设备 5.1试剂与耗材 除另有规定外，所用生化试剂均为分析纯，实验用水应符合C3/T6682一级水要求并经灭菌或采 用超纯水。提取RNA所用试剂应使用无RNA酶的灭菌水或超纯水配制，分装的容器应无RNA 务平台 酶污染。 5.1.1RNA提取试剂。 5. 1.2 三氯甲烷。 5.1.3异丙醇。 5.1.475%乙醇。 5.1.5 DEPC。 5. 1. 6 cDNA合成试剂盒。 5. 1.7 荧光定量PCR试剂盒。 1