SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2632—2010 微生物菌种常规保藏技术规程 Technical codes for routine microbial culture collection 行业标准信息服务平台 2010-05-27发布 2010-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2632—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国广东出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：王锦彤、黎学琴、史咏梅、陈泽瑜、陈小刚、王向阳。 行业标准信息服务平台 SN/T2632—2010 微生物菌种常规保藏技术规程 1范围 本标准规定了微生物菌种保藏的基本原则和常规方法。 本标准适用于微生物菌种常规保藏工作。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂 GB19489实验室生物安全通用要求 SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则 WS233微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 病原微生物实验室生物安全管理条例（国务院令第424号） 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 微生物microorganism 广泛分布于自然界中的一群肉眼看不到的微小生物，包括细菌、螺旋体、立克次体、衣原体、支原体、 放线菌、真菌、病毒等类，其结构简单，以单细胞、细胞群体或非细胞状态存在，在提供营养物质和适宜环 信息服务平 境的条件下，一般都能独立生活，迅速生长繁殖。 3.2 微生物菌种microbial strain 可培养的具有保藏价值的微生物纯培养（株）。 3. 3 菌种保藏culturecollection 微生物菌种用各种适宜的方法妥善保藏，避免死亡、污染，保持其原有性状基本稳定，以便于研究 交换和使用的目的。 3. 4 定期移植保藏法periodictransferonagarorinliquidmedium 亦称传代培养保藏法，包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中， 最适条件下培养，待菌种生长完全后，通常置于4℃～6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌 种保藏方法。 3. 5 液体石蜡保藏法preservationunderliquidparaffin 亦称矿物油保藏法，是定期移植保藏法的改良方法。是指将菌种接种在适宜的斜面培养基或半固 1 SN/T 2632—2010 体培养基上，最适条件下培养至对数生长期后注入火菌的液体石蜡，使其覆盖整个斜面或半固体，再通 3.6 沙土管保藏法sandpreservation 属于载体保藏法的一种，是指将培养好的菌种用无菌水制成悬浮液，注人灭菌的沙土管中混合均 匀，或直接将菌苔或孢子刮下接种于灭菌的沙土管中，使其吸附在载体上，将管中水分抽干后熔封或石 3.7 低温冷冻保藏法cryopreservation 将菌种保藏在一60℃～一80℃低温冰箱中以减缓其生理活动的一种菌种保藏方法。 3. 8 冷冻干燥保藏法freeze-dryingpreservation 亦称冻干法，是在无菌条件下将欲保藏的菌种制成悬浮液后冻结，在真空条件下使冰升华直至干 燥，从而使微生物的生理活动趋于停止而长期维持存活状态的一种菌种保藏方法。 4基本原则 4.1应针对菌种的生物学性状选择适宜方法进行保藏。 4.2应使保藏的菌种不染杂菌，使退化和死亡降低到最低限度。 4.3应保证菌种保藏的安全性，不能对周围环境造成污染和危害。病原微生物菌（毒）种的保藏应遵从 GB19489和WS233以及《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《人间传染的病原微生物菌（毒）种 保藏机构管理办法》的规定，根据病原微生物的危害类别在相应生物安全等级的实验室开展工作，且应 加强个体防护和环境保护。 行业标准信息服务平台 5方法 5.1定期移植保藏法 按附录A的规定。 5.2液体石蜡保藏法 按附录B的规定。 5.3沙土管保藏法 按附录C的规定。 5.4低温冷冻保藏法 按附录D的规定。 5.5冷冻干燥保藏法 按附录E的规定。 2