ICS 65.150 CCS B 50 4505 北 海 市 地 方 标 准 DB 4505 /T 000 8 — 202 3 岛礁贝类生态增殖技术规范 Technical specification for ecological enhancement of reef - inhabiting shellfish 202 3 - 03 - 08 发布 202 3 - 0 4 - 08 实施 北海市市场监督管理局 发 布 DB4505/T 0008 — 2023 I 目 次 前言 ................................ ................................ ................ III 1 范围 ................................ ................................ ............... 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ..... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ......... 1 4 海域选择 ................................ ................................ ........... 2 自然条件 ................................ ................................ ....... 2 海水理化条件 ................................ ................................ ... 2 5 物种选择 ................................ ................................ ........... 2 6 种苗培育及苗种要求 ................................ ................................ . 2 7 苗种检验检疫 ................................ ................................ ....... 2 检验资质机构要求 ................................ ............................... 2 抽检原则与数量要求 ................................ ............................. 3 检验内容与方法 ................................ ................................ . 3 8 生态增殖 ................................ ................................ ........... 3 苗种的适应性驯化及优选 ................................ ......................... 3 苗种运输方法 ................................ ................................ ... 3 底播增殖 ................................ ................................ ....... 4 9 增殖容量 ................................ ................................ ........... 4 10 贝类丰度监测 ................................ ................................ ...... 4 潜水员和设备 ................................ ................................ .. 4 潜水断面设置 ................................ ................................ .. 4 丰度监测与计算 ................................ ................................ 4 11 效果评估 ................................ ................................ .......... 4 基于贝类丰度的增殖效果评估 ................................ .................... 4 基于环境 DNA 的增殖效果评估 ................................ .................... 5 基于增殖群体回捕占比率的增殖效果评估 ................................ .......... 5 12 管理 ................................ ................................ .............. 6 附录 A （规范性） 贝类生态增殖放流情况记录表 ................................ ........... 7 附录 B （资料性） 基于环境 DNA 的贝类丰度计算 ................................ ........... 8 B.1 特异性 qPCR 扩增引物设计 ................................ ........................ 8 B.2 PCR 扩增、质粒构建及质粒标准模板制备 ................................ ............ 8 B.3 DNA 标准定量曲线制作 ................................ ............................ 8 B.4 环境 DNA 的 qPCR 扩增 及贝类丰度计算 ................................ .............. 8 附录 C （资料性） 基于微卫星分子标记的贝类增殖群体回捕占比率计算 ...................... 10 DB4505/T 0008 — 2023 II C.1 样本采集 ................................ ................................ ....... 10 C.2 样本保存 ................................ ................................ ....... 10 C.3 样本 DNA 提取 ................................ ................................ ... 10 C.4 多态性 SSR 位点的筛选 ................................ ........................... 10 C.5 PCR 扩增及基因分型 ................................ ............................. 10 C.6 贝类回捕抽样样本的遗传区分及回捕占比率计算 ................................ ..... 10 DB4505/T 0008 — 2023 III 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 — 2020 《标