ICS 13.100 C 50 DB32 江 苏 省 地 方 标 准 DB 32/T 3762.17—2021 新型冠状病毒检测技术规范 第 17 部分：核酸检测用假病毒阳性质控品 Technical specifications for SARS-CoV-2 detection Part 17: Pseudovirus positive control material for nucleic acid detection 2021- 12 - 09 发布 江苏省市场监督管理局 2022 - 01 - 09 实施 发 布 DB32/T 3762.17—2021 目 前 次 言 ............................................................................................................................................................ II 1 范围 .............................................................................................................................................................. 1 2 规范性引用文件 .......................................................................................................................................... 1 3 术语和定义 .................................................................................................................................................. 1 4 缩略语 .......................................................................................................................................................... 2 5 技术要求 ...................................................................................................................................................... 2 6 试剂和材料 .................................................................................................................................................. 3 7 仪器和设备 .................................................................................................................................................. 3 8 假病毒原液的技术要求 .............................................................................................................................. 3 9 质控品的制备 .............................................................................................................................................. 5 10 质控品的技术要求 ...................................................................................................................................... 5 I DB32/T 3762.17—2021 前 言 DB32/T 3762《新型冠状病毒检测技术规范》目前分为以下部分： ——第1部分：生物样本采集、运输和保存； ——第2部分：病毒分离与鉴定； ——第3部分：核酸荧光PCR检测程序； ——第4部分：重组酶介导等温扩增程序； ——第5部分：血清IgM和IgG抗体酶联免疫吸附检测程序； ——第6部分：血清IgM和IgG抗体胶体金免疫层析检测程序； ——第7部分：空气样本检测与评估； ——第8部分：物体表面检测与评估； ——第9部分：医务人员职业暴露检测与评估； ——第10部分：微量血清中和试验； ——第11部分：全基因组高通量测序； ——第12部分：药物体外抗病毒效果测定； ——第13部分：叠氮溴化丙锭-荧光PCR检测程序； ——第14部分：N亚基因组荧光PCR检测程序； ——第15部分：血清/血浆IgM和IgG抗体磁微粒化学发光法检测程序； ——第16部分：核酸数字PCR法； ——第17部分：核酸检测用假病毒阳性质控品； ——第18部分：规模化核酸检测程序。 本文件为DB32/T 3762 的第17部分。 本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由江苏省卫生健康委员会提出。 本文件由江苏省卫生标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：南京市计量监督检测院、江苏省疾病预防控制中心、苏州市疾病预防控制中心。 本文件主要起草人：林婧、朱立国、林学勇、胡宁、胡啟龙、王尚君、范宇宸、朱文、张雨晨、洪 捷、谈忠鸣、夏瑜、樊欢、邓斐。 II DB32/T 3762.17—2021 新型冠状病毒检测技术规范 第 17 部分：核酸检测用假病毒阳性质控品 1 范围 本文件规定了新型冠状病毒核酸检测用假病毒类弱阳性质控品的术语和定义、缩略语、试剂和材料、 仪器和设备、假病毒原液的技术要求、质控品的制备和质控品的技术要求。 本文件适用于新型冠状病毒核酸检测用假病毒类弱阳性质控品的技术要求以及评价方法。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 JJF 1006 一级标准物质技术规范 JJF 1343 标准物质定值的通用原则及统计学原理 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 质控品 control material 用于体外诊断的质量控制物质，是一种旨在用于医学用途的检测系统中使用的物质、材料、物品或 设备，其目的是评价或验证测量精密度、测量准确度、由于试剂或分析仪器的变化检测系统可能产生的 分析偏差等性能特征，可用于能力验证、实验室内质量控制。 3.2 假病毒 pseudovirus 一种具有病毒拟似的物理结构和特异性核酸序列的病毒样粒子，其分析特性与真实病毒相似，但不 具备自我复制和感染的能力。 3.3 假病毒质控品 pseudovirus control material 由假病毒原料定量分装后制成，能够参与到病毒检测从提取到扩增的全过程；具有生物安全性的同 时可作为测量标准，用于病毒核酸定性和定量测量方法的验证评价以及实验室的质量控制。 3.4 计量溯源性 metrological traceability 1 DB32/T 3762.17—2021 通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准 （通常是与国家测量标准或国际测量标准）联系起来的特性。 3.5 同源性 homology 两个核酸分子的核苷酸序列间的相似程度。本文指假病毒质控品中目的基因序列与相应的真实病毒 参考毒株序列的一致性。 3.6 均匀性 uniformity 同一批次生产的假病毒质控品，每个最小包装单元含有等量的目标假病毒的状态。通过测量取自不 同包装单元或取自同一包装单元的、特定量的样品，定量测量结果落在规定不确定度范围内，则可认为 质控品所含目标假病毒的量是均匀的。 3.7 稳定性 stability 假病毒质控品在特定的保存条件和保存时间内，假病毒的量保持在规定范围内的能力。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 DMEM ：Dulbecco改良培养基（Dulbecco’s modified eagle’s medium） PCR ：聚合酶链式反应（polymerase chain reaction） qPCR ：荧光定量聚合酶链式反应（quantitative polymerase chain reaction） RT-PCR ：逆转录聚合酶链式反应（reverse transcription polymerase chain reaction） RT-qPCR ：逆转录荧光定量聚合酶链式反应（reverse transcription quantitative polymerase chain reaction） RNase ：核糖核酸酶（ribonuclease） 5 技术要求 5.1 假病毒质控品的技术要求主要分为两个方面，包含对假病毒原液的技术要求，如假病毒内靶标 RNA 序列的同源性、假病毒原液的杂质残留等；还包含对质控品成品的技术要求，如靶标 RNA 定值、 均匀性、稳定性等。 5.2 假病毒质控品必须同时满足以下 8 点技术要求，才能作为新型冠状病毒核酸检测用的弱阳性质控 品： a) b) c) d) 用于制备质控品的原料假病毒含有与新冠核酸检测的靶标 RNA 序列一致的 RNA ； 用于制备质控品的假病毒原液不含有 cDNA 杂质； 用于制备质控品的假病毒原液无菌； 质控品的靶标 RNA 浓度为试剂盒检出限的 1.5-3 倍左右，且定值结果具有计量溯源性；