DB23 ICS 65.020.20 B 05 黑 龙 江 省 地 方 标 准 DB 23/T 2713—2020 大豆胞囊线虫种群动态监测技术规程 2020 -11- 26 发布 黑龙江省市场监督管理局 2020-12 - 25 实施 发 布 DB23/T 2713—2020 前  言 本标准依据GB/T 1.1-2009的编写规则起草。 本标准由黑龙江省农业农村厅提出。 本标准起草单位：黑龙江省农业科学院大豆研究所、黑龙江省乡村产业发展中心、黑龙江省植检植 保站、黑河市爱辉区农业农村局。 本标准主要起草人：王家军、于佰双、刘鑫磊、张瑞萍、马云凤、王广金、高明杰、张必弦、李进 荣、刘秀林、栾晓燕、王雪扬、李 鹏、韩新春、代丽婷、崔丽伟、季妮娜。 I DB23/T 2713—2020 大豆胞囊线虫种群动态监测技术规程 1 范围 本标准规定了大豆胞囊线虫（Heterodera glycines Ichinohe）种群动态监测技术的术语和定义、 仪器设备、田间取样、病土生理小种鉴定、种群动态监测和档案管理。 本标准适用于大豆胞囊线虫生理小种鉴定和种群动态监测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NT/T 3114.1 大豆抗虫性鉴定技术规范第 1 部分 NY/T 3059-2016 3 大豆抗胞囊线虫鉴定技术规程 术语和定义 NY/T 3059-2016 界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 雌虫指数（Female Index，FI） FI=各鉴别寄主根上雌虫数除以对照品种 Lee 根上雌虫数的百分数。 3.2 出现频率（Occurrence Frequency） 大豆胞囊线虫种群内各生理小种出现的频率。 生理小种的出现频率=该生理小种出现的样本数除以调查总样本数的百分数。 3.3 优势小种（Dominant Race） 大豆胞囊线虫种群内出现频率最高的生理小种。 3.4 种群动态（Population Dynamics） 大豆胞囊线虫种群内生理小种组成及各小种出现频率的变化、优势小种的更迭。 3.5 种群监测（Population Monitoring） 1 DB23/T 2713—2020 以春播作物生产年为单位，逐年统计地域性生产区内每年大豆胞囊线虫各生理小种出现的类别和频 率。 4 仪器设备 4.1 体式显微镜 用于观察病土样本中分离出的胞囊。 4.2 高压灭菌锅 用于基质的消毒处理。 4.3 标准网筛 标准筛一套（20目、80目），用于线虫胞囊的分离。 5 田间取样 5.1 田间取样点选择 田间发生过大豆胞囊线虫病的地块或重茬种植大豆3年以上的地块都可以作为取样点。 5.2 田间取样时期 病土最佳取样时期为当季大豆田秋收后至封冻前，如错过这个时期，第二年的解冻后至播种前也可 以。 5.3 田间取样方法 田间取样采用“Z”字形取样法，每地块选取10点-20点，先剥离垄上5cm地表层土壤，在大豆根围 向下层取土15cm深，每点取土量为1000g，所有点取土样后混合均匀，记作1份土样，总样本重量要>10kg， 并标记好采集样本相关信息，记录表应按照附录A的规定。 5.4 检验取样土的有效性 土样取回后，每个样品称取100g风干土，在室内分离土壤中的胞囊，百克风干土中胞囊量≥35个的 土样为有效土样。胞囊量不达标的土样，可以采取人工淘取该土样的胞囊并回接至该土样，或在温室里 向其内播种感病大豆，促进大豆胞囊线虫的繁殖世代，增加取样土的胞囊存有量以达到有效土样的标准。 5.5 取样土保存 秋收后取回的土样应放在室外常温保存，春季取回的土样可直接进行鉴定。 6 病土生理小种鉴定 6.1 病土鉴定基质配置 病土按照土：沙=4:1的比例混合均匀。细沙过20目筛子，在使用之前进行消毒处理。 6.2 病土鉴定圃设置 2 DB23/T 2713—2020 将混合好的病土平均分装到15个接种盆内（直径12 cm，高15 cm），病土填装深度为12 cm，3次重 复按照如下图所示进行摆放。 说明： 1.矩形框表示每份土样试验区； 2.实线表示同一份土样中同一个鉴别寄主的3次重复； 3.圆圈图形表示每个盆栽处理。 图1 病土盆栽鉴定配置示意图 6.3 播种及管理 每份土样中每个鉴别寄主播种 3 盆，每盆播种 5 粒种子，覆土2 cm，正常盆栽管理，出苗后，选 取长势一致的大豆苗，每盆留苗3 株。三出复叶长出后，适当控水。 6.4 调查 调查方法和生理小种划分应按照NY/T 3059-2016中的附录A执行。 7 种群动态监测 比较各年度大豆胞囊线虫生理小种鉴定结果，明确取样点大豆胞囊线虫各优势种群出现频率，监测 大豆胞囊线虫种群变化和优势小种的更迭。 8 档案管理 大豆胞囊线虫病土样本采集原始记录及种群鉴定结果等记载表格应按照NY/T 3059-2016和附录A执 行。 3 DB23/T 2713—2020 附录 A (规范性附录) 样本采集记录表 A.1 样本采集记录表 表 A.1 样本采集记录表 样本编号 采集时间 采集地点 地理位置 (经纬度) 土壤类型 当季种植的大 豆品种 地块发病情况 采集人 4