ICS 65.020 B 21 吉 DB22 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 3177—2020 杂交大豆质核互作雄性不育系鉴定规程 Code of practice of cytoplasmic-nuclear interaction male sterile line of hybrid soybean 2020 - 10 - 14 发布 吉林省市场监督管理厅 2020 - 10 - 30 实施 发 布 DB22/T 3177—2020 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由吉林省农业农村厅提出并归口。 本标准起草单位：吉林省农业科学院。 本标准主要起草人：张春宝、赵丽梅、彭宝、张井勇、闫昊、张伟、林春晶、王鹏年、丁孝羊。 I DB22/T 3177—2020 杂交大豆质核互作雄性不育系鉴定规程 1 范围 本标准规定了杂交大豆质核互作雄性不育系的鉴定圃要求、鉴定要求、鉴定方法与评价指标、鉴定 报告。 本标准适用于杂交大豆质核互作雄性不育系鉴定。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 质核互作雄性不育系 cytoplasmic-nuclear interaction male sterile line 雌蕊发育正常而雄蕊花粉败育，自交不能结实，雄性不育性受细胞质不育基因和对应的细胞核不育 基因共同控制的雄性不育品种（系）。 2.2 盛花期 flowering period 开花植株达总株数 50% 的日期（月/日）。 2.3 表型一致性 phenotypic consistency 植株在表型特征特性方面的一致程度。 2.4 花粉败育 pollen abortion 植株花药中无花粉或产生的花粉不能正常发育而失去活力的现象。 2.5 花粉败育率 pollen abortion rate 不育花粉数占总花粉数的百分比。 2.6 镜检 microscopic examination 将待检标本花粉取样、制片，在显微镜下观察、分析、判断花粉育性的检查方式。 2.7 成熟期 maturation period 整株豆荚呈现品种原有色泽，籽粒变硬或摇动时有响声的植株达 95% 的日期（月/日）。 2.8 不育株 sterile plant 在网室隔离条件下，群体单株有效荚数不多于 3 个的植株。 3 鉴定圃要求 1 DB22/T 3177—2020 3.1 种植环境 鉴定现场生态环境和栽培条件应与生产条件相近，开花前对不育系群体进行网室隔离，网室纱网孔 径0.3 mm～0.6 mm。 3.2 种植株数 3.2.1 不育系 在适宜不育系繁殖的播种期内，种植不少于 500 株待鉴定的不育系群体。 3.2.2 保持系 网室外种植同型保持系不少于 100 株。 4 鉴定要求 4.1 鉴定人员 从事作物遗传育种、栽培生理、种子管理、种子检验、种子生产或植保等专业人员不少于 3 名。 4.2 鉴定时期与内容 4.2.1 盛花期 进行不育系表型一致性和花粉败育率鉴定。 4.2.2 成熟期 进行不育株率鉴定。 5 鉴定方法与评价指标 5.1 表型一致性鉴定 5.1.1 现场观察 在盛花期观察与同型保持系表型的一致性，包括花色、叶形、株高、茸毛色等。观察株数不少于 500 个单株。 5.1.2 结果计算 表型一致性计算按公式（1）。 C ZT  Z  100 .................................... (1) ZT 式中： C——表型一致性，单位为百分比（%）； ZT——观察样本总数，单位为株； Z——杂株数，单位为株。 计算结果精确到小数点后一位。 2 DB22/T 3177—2020 5.1.3 评价指标要求 表型一致性≥99.0 %。 5.2 花粉败育率鉴定 5.2.1 田间取样 在盛花期从不育系群体中随机取不少于 100 个单株，实际观察 100 株花粉败育率。 5.2.2 镜检 5.2.2.1 每株取 2 个成熟花苞，剥取花药，放于载玻片上，捣碎后用 1% 碘-碘化钾溶液染色。 5.2.2.2 镜下观查有无花粉被染色或花粉染色程度，每个样片观察 3 个～5 个视野，总观测花粉粒数 不少于 100 粒： a) 花粉不被染色、形态皱缩不规则,或花粉圆形、很少或没有内含物、染色浅、大小不一，均判 定败育； b) 花粉可被染色、圆形而饱满、染色深、大小较一致，判定可育。 5.2.3 结果计算 花粉败育率按公式（2）。 S NT  N  100 .................................... (2) NT 式中： S——花粉败育率，单位为百分比（%）; NT——观测花粉粒总数，单位为粒； N——正常被染色花粉粒总数，单位为粒。 计算结果精确到小数点后一位。 5.2.4 评价指标要求 花粉败育率≥99.0 %。 5.3 不育株率鉴定 5.3.1 田间观察 在成熟期观察不育系结荚情况，观察株数不少于 500 株。 5.3.2 结果计算 不育株率计算按公式（3）。 B KT  K  100 .................................... (3) KT 式中： B——不育株率，单位为百分比（%）； 3 DB22/T 3177—2020 KT——检测样本总数，单位为株； K——可育株数，单位为株。 计算结果精确到小数点后一位。 5.3.3 评价指标要求 不育株率≥99.8 %。 6 鉴定报告 鉴定报告见 附录 A 。 4 DB22/T 3177—2020 AA 附 录 A （规范性附录） 杂交大豆质核互作雄性不育系鉴定报告 不育系名称 选育单位 通讯地址 联系人 联系电话 鉴定时间 鉴定地点 鉴定结论： 鉴定组组长签字： 鉴定组成员签字： 年 月 日 _________________________________ 5