ICS 65.20.30 B 45 玉 DB5304 溪 市 地 方 标 准 DB 5304/T 045—2020 玉溪市肉牛人工授精技术 2020 - 07 - 28 发布 玉溪市市场监督管理局 2020 - 09 - 27 实施 发 布 DB5304/T 045—2020 前  言 本标准的编写符合GB/T 1.1-2009的规则。 本标准由玉溪市畜牧站提出并归口。 本标准起草单位：玉溪市畜牧站、元江县畜牧与饲草饲料站。 本标准起草人：王红琴，杨灼雄，李鸿俊，孙峰，张先勤，杨旭，贺子恒，丁海波，罗何勇，柏秀 洪，穆云海，魏建宏，刘敏，孙艳霞，张新玲。 I DB5304/T 045—2020 玉溪市肉牛人工授精技术 1 范围 本规程规定了玉溪肉牛人工授精技术的基本操作方法和操作要求。 本规程适用于玉溪市肉牛规模养殖场人工授精，散养户可参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4143—2008 牛冷冻精液 GB/T 5458—2012 液氮生物容器 NY/T 1234—2018 牛冷冻精液生产技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 人工授精 用人工方法适时将精液输入发情母畜生殖道内达到受孕，以代替公母畜交配而繁殖后代的一种繁殖 技术。 3.2 冷冻精液 经特殊方法处理的精液超低温冷冻后在液氮中（-196℃）长期保存，以下简称冻精。 3.3 发情鉴定 通过外部观察、直肠检查等方法对母牛发情（征状）的确定。 3.4 妊娠诊断 在受配后一定时间内采用外部观察、直肠检查等手段判断受配母牛是否成功妊娠的方法。 4 冻精的保存及取用 4.1 冻精的保存 4.1.1 冻精必须在液氮罐中储存，运输和贮藏过程中均不能脱离液氮罐，液氮罐必须每年清洗一次， 液氮罐的条件应符合 GB/T 5458—2012 液氮生物容器的规定。 4.1.2 液氮罐在运输过程中要注意防热、防震、防碰撞，容器外部加上保护套或其它保护装置。 1 DB5304/T 045—2020 4.2 冻精的取用 4.2.1 每批冻精在人工授精前、每年繁殖季节开始前和新引进精液后，必须进行精子活力的检查，精 液活力低于 0.6，精液不能使用，精子活率检查参照 GB 4143—2008 牛冷冻精液规定执行；定期检查并 及时添加液氮罐中的液氮，液氮量少于液氮罐容量的 1/3 时，应及时补充。 4.2.2 取冻精时，液氮罐中盛放冻精的提斗不能超过液氮罐的颈部，冻精提取时间不超过 15 秒，若超 时则需重新放回浸泡 3 秒后再提取。 4.2.3 冻精解冻时直接把细管投入 38℃-40℃温水中，5-8 秒钟后取出，即冻精颜色由乳白色变为黄色 即可。 4.2.4 解冻精液在输精前应保存 17℃-20℃温度下，以保持精液的活力。在解冻后 1.5 小时内输精， 最迟不能超过 2 小时，如超时则作废弃处理；冻精应避免日射及烟酒刺激。 5 母牛发情鉴定 5.1 外部观察法 5.1.1 试情法 母牛主动接受试情公牛爬跨、不避让。 5.1.2 观察法 母牛表现为不安、哞叫、食欲减少，主动接受同圈舍母牛爬跨，外阴部潮红、肿大并流出大量粘稠 的黏液且黏液透明、牵缕不断，以手压十字部时母牛表现凹腰、高举尾根等，有时也会频频排尿。 5.1.3 计步器法 母牛通过佩戴计步器，利用接收器统计牛的运动量达到发情标准判定为发情。 5.2 直肠检查法 直肠检查卵巢上有成熟卵泡，无持久黄体，卵泡弹性较好，且两侧卵巢体积差别明显，可以进行人 工授精。对于不同年龄、不同营养状况的发情牛，配种时间的安排因区别对待，青年牛发情排卵时间较 其他牛晚，经产且营养状况良好牛次之，营养状况差的牛发情排卵最快 5.3 B 超检查法 B超检查是通过B超探头对卵巢及卵泡发育进行视频观察，若发现卵巢上有成熟卵泡即可输精。 6 输精器械 6.1 消毒药品 酒精75%，2%-5%新洁尔灭液或0.1%高锰酸钾溶液。 6.2 器械 2 DB5304/T 045—2020 输精枪，长镊子，精液剪，水浴锅或铝制饭盒，温度计，一次性输精枪外套，一次性长臂塑料手套， 消毒纱布或毛巾等。 7 品种选择 使用的冻精品种应按照NY/T 1234—2018牛冷冻精液生产技术规程生产。 品种选择应根据当地情况、养殖用途、市场需求等结合品种特征综合考虑而定。 玉溪市推广养殖的肉牛品种及其主要特征详情见附录A。 8 人工授精 8.1 输精时间 若母牛早上有发情表现，下午就可进行输精；若下午发情，则第二天早上必须输精。为提高母牛受 胎率，8-12小时后可进行第二次输精。青年牛输精时间稍推迟1-2小时，老年牛输精时间可以稍提1-2 小时。 8.2 准备工作 配种员应将手指甲修剪干净并磨滑，用消毒液对双手进行消毒，再用肥皂水涂抹双手，以利润滑。 将配种器械进行高温消毒，以防对牛体造成交叉感染，并按规程将解冻后的精液装入输精枪中待用。把 待配母牛保定好，将牛尾拉开，用消毒水对母牛肛门进行清洗，并将待配母牛的肛门粪便掏空，以利于 下一步进行操作。 8.3 消毒 8.3.1 输精器械消毒 8.3.1.1 输精前消毒 精液剪、输精枪和装好精液的输精枪外套用75%的酒精擦拭消毒。 8.3.1.2 输精后消毒 精液剪，输精枪清洗干净后擦拭并用75%的酒精消毒，放置于干燥处下一次输精。 8.3.2 发情母牛外阴消毒 助手将牛尾牵引至配种员方便操作的一侧固定，或配种员将牛尾牵引至不影响自己操作的一侧并固 定，充分暴露外阴，用2%-5%新洁尔灭液或0.1%高门酸钾溶液清洗外阴（洗净外阴的粪便和其他如分泌 物干痂及皮屑等），然后用消毒过的毛巾或纱布擦拭干净。 8.4 输精技术：直肠把握深部输精法 技术人员用左手伸入母牛直肠，进入直肠后用手指隔着直肠壁把握子宫颈。右手持输精枪向阴门 45°倾角斜插入，以避开尿道口，后平行直抵子宫颈口，输精枪达子宫口时，用输精枪头进行探索，在 子宫颈头可明显感觉有“沙沙”的像沙子硬硬的。此时两手配合把输精枪导入子宫颈管，当输精枪达子 宫颈管最里端时，应适当退出一点，而后把解冻精液送入子宫，退出输精枪即完成整个配种过程。 3 DB5304/T 045—2020 9 配种登记和饲养管理 9.1 配种登记 见附录B 9.2 饲养管理 配种后加强母牛饲养管理，仔细观察采食、运动等日常行为，给予适当的休息，一星期内禁止使役 和激烈运动，一周内不喂食盐，以青绿饲料为主，观察是否再出现发情。 10 妊娠诊断 在最后一次发情配种后20天-60天进行妊娠诊断。 10.1 外部观察法 观察是否出现周期发情，如果配种后两个情期不返情，且性情温和，食欲增加，即可初步判定为受 胎。妊娠3个月后，行为谨慎安稳，性情变得温顺、安静，食欲增进，体况转好，毛色光泽滑润；妊娠5～ 6个月后，腹围有所增大，左右不对称，右下腹部凸起较明显。到妊娠后期（7～8个月以后），腹围增 大明显，在右下腹壁外常可见到胎动，隔着右侧的腹壁可触诊到胎儿，紧贴母体腹壁时，偶尔能听到胎 儿的心音，乳房发育显著增大。 10.2 直肠检查法 最后一次配种35天-60天通过直肠检查触摸卵巢和子宫角判定是否怀孕。检查时，先摸到子宫颈， 再将手指向前滑动，寻找角间沟；然后将手向前、向下、再向后，试把两个子宫角都掌握在手内，分别 触摸。这时可先握住子宫颈将子宫角向后拉，然后手带着肠管迅速向前滑动，握住子宫角，这样逐渐向 前移，就能摸清整个子宫角。摸过子宫角后，在其尖端外侧或下侧寻找卵巢。一侧卵巢上有突出于卵巢 表面的怀孕黄体（卵巢上同时似有多个卵泡发育，似由許多個小球堆成一個大的球体或圆锥体，触摸时 卵巢似蜂窝狀），且比另一侧卵巢大2陪以上，且两侧卵巢质地均较柔软即为怀孕；妊娠40天-60天的角 间沟清楚，两角之间的分岔仍然明显，只是两子宫角大小不对称，妊娠角较空角粗1-2倍，角壁变薄变 软有波动。 10.3 B 超诊断法 在最后一次配种20天后利用B超直肠探头在母牛子宫进行探查胚泡的形成情况和卵巢的妊娠黄体形 成情况，为提高准确率45天-60天重复检查一次。 4 DB5304/T 045—2020 AA 附 录 A （资料性附录） 玉溪市推广养殖的主要肉牛品种及其特征 品种 主要特征 肉质 云岭牛 毛色以红、黑、灰为主，四肢较长，尾细长， 头稍小，多数无角，成年公牛体重700kg～ 1000kg、母牛450kg～700kg，屠宰率达 65.81%。 生产雪花牛肉的育肥牛70%以上 个体肉品质达到A3以上等级，牛 肉口感惬意、多汁、滋味好，可 与日本神户牛肉媲美。 西门塔尔牛 毛色多为黄白花或红白花色，个体较大，成 年体重达800kg～1000kg，屠宰率为65%。 肉质鲜嫩、营养价值高、品质好, 可用来生产高档牛肉。 安格斯牛 无角，毛色有棕红色和纯黑，适应性强，繁 殖力强，成年体重达800kg～900kg左右，屠 宰率达60%～65%。 是上档的高级雪花牛肉，似大理 石纹路，也叫大理石肉，肉质细 嫩，营养价值极高，做高档牛排 好料理肉。 短角牛 毛色多为棕红色，有沙毛，适应性强，繁殖 力强，成年体重达700kg～1000kg左右，屠宰 率达65%。 肉品质较好，肉质鲜嫩。 5 DB5304/T 045—2020 BB 附 录 B （资料性附录） 牛人工授精登记表 序号 母牛号 公牛号 配种日期 妊娠检测 复配日期 预产期 输精员 6