ICS 65.020 B 16 备案号： 江 DB32 苏 省 地 方 标 准 DB32/T 3489—2018 玉米粗缩病人工接种鉴定技术与抗性评价 规程 Technical regulation for evaluating maize varieties resistance to maize rough dwarf disease by artificial inoculation 2018-11-9 发布 2018-11-30 实施 江苏省质量技术监督局 发布 DB32/T 3489—2018 前 言 本标准按 GB/T 1.1—2014《标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写》编制。 本标准由江苏省农业科学院提出并归口。 本标准起草单位：江苏省农业科学院。 本标准起草人：周彤、杜琳琳、周益军、程兆榜、兰莹、孙枫。 I DB32/T 3489—2018 玉米粗缩病人工接种鉴定技术与抗性评价规程 1 范围 本标准规定了玉米品种粗缩病（病原：水稻黑条矮缩病毒Rice black-streaked dwarf virus）抗性人工 接种鉴定的有关定义、技术规范及抗性评价标准。 本标准适用于省级玉米品种试验，品种抗病性比较试验、主导品种的抗病性监测等均可参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的的修改单）适用于本文件。 NY/T 1209-2006 农作物品种试验技术规程 玉米 NY/T 2955-2016 水稻品种试验 水稻黑条矮缩病抗性鉴定与评价技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 病株 infected plants 发生玉米粗缩病症状的玉米植株（病株标准见6.2）。 4 接种用灰飞虱的准备 4.1 灰飞虱的来源 田间采集灰飞虱若虫或成虫。 4.2 饲养灰飞虱的基本条件 可调控温、光的养虫室（光照每天12 h，温度控制在25℃±2℃范围内）、玻璃杯、尼龙纱布（网 眼规格1mm）、养虫架、适宜灰飞虱繁殖的水稻种子；转移灰飞虱用黑布、毛笔、吸虫管等。 4.3 灰飞虱群体的饲养 选取饲喂灰飞虱的水稻种子（宜选用武育粳3号）用水浸种24h后，纱布覆盖25℃±2℃催芽24 h， 选取发芽良好的种子25 粒~30 粒均匀播于盛有自然肥力土壤的玻璃杯(内径为60 mm~200 mm)中；大约 6 d~7 d后，待苗长至一叶一心期时，将待产的单头灰飞虱移入杯中进行饲养，约3 d后待灰飞虱产卵完 毕将成虫移出，7 d~10 d后开始孵化出1龄若虫备用。 4.4 饲毒方法 1 DB32/T 3489—2018 RT-PCR鉴定为携带水稻黑条矮缩病毒的小麦、水稻或玉米病株栽种于5000 mL烧杯中（RT-PCR方 法按照NY/T 2955-2016附录B执行），土面覆盖滤纸，将4.3繁育的适量1龄~2龄灰飞虱移入其中, 并用 纱布封口。饲毒2d后将虫移入预先育有武育粳3号秧苗的1000mL烧杯中饲养，循回11 d~13 d后，每批随 机取出100头以上灰飞虱，按照NY/T 2955-2016附录A的要求检测灰飞虱群体带毒情况，计算灰飞虱群 体带毒率，备用。 5 接种 5.1 育苗方法 参鉴品种（含试验预设对照，宜采用玉米品种郑丹958为感病对照）经浸种、催芽；选取50粒左右 发芽良好的种子，均匀播于盛有自然肥力土壤的内径为120 mm~150 mm玻璃杯中。 5.2 接虫数量 选取处于3龄～5龄的获毒灰飞虱群体，按公式(1)计算接种数量： IVS  N  PVS ………………………………………………（1） 式中: IVS—单株有效接种虫量，单位为头每株（头/株）； N—单株接种灰飞虱数量，单位为头每株（头/株）； PVS—灰飞虱带毒率。 按照4.4中灰飞虱群体带毒率，计算每株接虫数量，使IVS值控制在3头/株。 5.3 接种条件 于玉米苗二叶一心期选择长势一致的30株苗用于接种（去除其它苗）。接种时间为1 d～2 d，接种 温度25℃±2℃，每天上午和下午各赶虫一次，使灰飞虱分布均匀。接种后赶出灰飞虱并喷施杀虫剂， 保证玉米苗上的灰飞虱全部扑杀，喷药后1d再将接种过的玉米苗移栽，15℃～30℃条件下培育。 5.4 重复 重复三次。 6 调查 6.1 调查时间 在玉米吐丝抽穗期调查玉米病株数。 6.2 调查标准 玉米粗缩病发病症状：植株叶色浓绿、节间缩短，植株矮化，高度常不及健株的一半；叶片变宽变 厚，叶片背面出现纵向蜡滴状白色突起；植株根系少而短；雄穗不能抽出或无花粉、雌穗畸形不实或籽 粒减少。依据症状有无按附录A记录发病株数量。 6.3 发病率计算 参照公式(2)方法计算发病率。若出现感病对照品种的发病率小于50％，则应分析原因，并重新进 行试验。 发病率Ri表示，数值以%计，按公式(2)计算： 2 DB32/T 3489—2018 Ri  ni  100% nt …………………………………………（2） 式中: Ri—发病率； ni—病株数； nt—总株数。 计算结果精确到小数点后一位。 7 抗性评价 7.1 抗性分级标准 根据发病率进行抗性评价，各级别评定标准遵照附录B（参照NY/T 1209-2006 农作物品种试验技 术规程 玉米）。 7.2 抗性评定 当品种抗性在不同批次间鉴定结果表现不一致时，以发病最重的结果为准。 3 DB32/T 3489—2018 附录A （规范性附录） 玉米粗缩病品种抗性调查记载表 玉米粗缩病品种抗性调查记载表见表A.1。 表A.1 玉米粗缩病品种抗性调查记载表 播种日期 调查日期 调查人 记载人 品种编号 总株数 病株数 发病率 … 感病对照 4 DB32/T 3489—2018 附录B （规范性附录） 玉米粗缩病品种抗性评价分级标准 玉米粗缩病品种抗性评价分级标准见表B.1。 表B.1 玉米粗缩病品种抗性评价分级标准 病级 发病率（%） 抗性水平 0级 0 免疫 1级 0.01～5.00 高抗 3级 5.01～15.00 抗病 5级 15.01～30.00 中感 7级 30.01～50.00 感病 9级 >50.00 高感 5