ICS 65.120 B 46 DB22 吉 林 省 地 方 标 准 DB22/T 2780—2017 青贮饲料发酵品质分级技术规程 Grading technical regulation for silage fermentation quali 2017 - 12 - 11 发布 吉林省质量技术监督局 2018 - 04 - 01 实施 发 布 DB22/T 2780—2017 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。 本标准起草单位：吉林大学。 本标准主要起草人：王鹏、唐鸿宇、丁雪梅、张嘉保、陈承祯、房恒通、赵云、史旭东、沈景林。 I DB22/T 2780—2017 青贮饲料发酵品质分级技术规程 1 范围 本标准规定了青贮饲料发酵品质评定的术语和定义、取样、样本处理、检测方法、发酵品质分级和 发酵品质分级判定。 本标准适用于以牧草、饲料作物以及农作物副产品等为原料调制的青贮饲料发酵品质分级。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6432-1994 饲料中粗蛋白测定方法 GB/T 6435-2014 饲料中水分的测定 NY/T 2129-2012 饲草产品抽样技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 青贮饲料 silage 以新鲜或半干的牧草、饲料作物及农作物副产品等为原料，在厌氧条件下利用发酵原料表面附着的 乳酸菌发酵，或者在外源添加剂的作用下促进或抑制微生物发酵，调制出的具有特殊芳香气味的饲料。 3.2 挥发性脂肪酸 volatile fatty acid 青贮饲料中由微生物发酵产生的乙酸、丙酸、丁酸及其它六碳以下的短链脂肪酸。 3.3 氨态氮 ammonia nitrogen 青贮原料的蛋白质在发酵过程中分解产生的具有挥发性质的以氨形式存在的小分子含氮物质。 3.4 总氮 total nitrogen 青贮饲料的总含氮量。 4 取样 取样方法按照 NY/T 2129-2012 规定执行。 5 样本处理 1 DB22/T 2780—2017 5.1 青贮浸提液制备 取新鲜青贮饲料样品 20 g，加入 180 mL 蒸馏水，打碎匀浆。浆液经 4 层纱布过滤后，再经滤纸 过滤，滤出液置于 4 ℃ 冷藏 24 h 后即为青贮浸提液。 5.2 风干样本制备 取新鲜青贮饲料样品 100 g ，60 ℃ 条件下连续烘干 72 h ，回潮 24 h 。 6 检测方法 6.1 含水量 含水量按照 GB/T 6435-2014 规定执行。 6.2 总氮量 总氮量按照 GB/T 6432-1994 规定执行。 6.3 氨态氮含量 氨态氮含量的测定方法按照附录 A 。 6.4 挥发性脂肪酸含量 挥发性脂肪酸含量的测定方法按照附录 B 。 7 发酵品质分级 发酵品质综合分值按公式（1）计算。 X  A  B  C ..................................... (1) 式中： X ——发酵品质综合分值； A 、 B 、 C ——按表1取值。 表1 青贮饲料发酵品质评定指标和分级 挥发性脂肪酸含量（鲜重%） 氨态氮占总氮比例（%） （%） 分数 （A） （%） 乙酸+丙酸含量 分数 （A） （%） 分数 （B） 丁酸及六碳以下脂肪酸含量 （%） 分数 （C） （%） 分数 （C） 0.0～5.0 50 14.0～14.2 24 0.00～0.20 10 0.000～0.012 40 0.325～0.337 14 5.1～5.5 49 14.3～14.4 23 0.21～0.39 9 0.013～0.024 39 0.338～0.349 13 5.6～6.0 48 14.5～14.7 22 0.40～0.52 8 0.025～0.037 38 0.350～0.362 12 6.1～6.5 47 14.8～14.9 21 0.53～0.65 7 0.038～0.049 37 0.363～0.374 11 6.6～7.0 46 15.0～15.2 20 0.66～0.78 6 0.050～0.062 36 0.375～0.387 10 7.1～7.5 45 15.3～15.4 19 0.79～0.91 5 0.063～0.074 35 0.388～0.399 9 7.6～8.0 44 15.5～15.7 18 0.92～1.04 4 0.075～0.087 34 0.400～0.412 8 2 DB22/T 2780—2017 表 1（续） 挥发性脂肪酸含量（鲜重%） 氨态氮占总氮比例（%） （%） 分数 （%） （A） 乙酸+丙酸含量 分数 （A） 丁酸及六碳以下脂肪酸含量 分数 （%） （%） （B） 分数 （C） （%） 分数 （C） 8.1～8.5 43 15.8～15.9 17 1.05～1.17 3 0.088～0.099 33 0.413～0.424 7 8.6～9.0 42 16.0～16.2 16 1.18～1.30 2 0.100～0.112 32 0.425～0.437 6 9.1～9.5 41 16.3～16.4 15 1.31～1.49 1 0.113～0.124 31 0.438～0.449 5 9.6～10.0 40 16.3～16.7 14 ≥1.50 0 0.125～0.137 30 0.450～0.462 4 10.1～10.4 39 16.8～16.9 13 0.138～0.149 29 0.463～0.474 3 10.5～10.7 38 17.0～17.2 12 0.150～0.162 28 0.475～0.487 2 10.8～10.9 37 17.3～17.4 11 0.163～0.174 27 0.488～0.499 1 11.0～11.2 36 17.5～17.7 10 0.175～0.187 26 ≥0.500 0 11.3～11.4 35 17.8～17.9 9 0.188～0.199 25 11.5～11.7 34 18.0～18.2 8 0.200～0.212 24 11.8～11.9 33 18.3～18.4 7 0.213～0.224 23 12.0～12.2 32 18.5～18.7 6 0.225～0.237 22 12.3～12.4 31 18.8～18.9 5 0.238～0.249 21 12.5～12.7 30 19.0～19.2 4 0.250～0.262 20 12.8～12.9 29 19.3～19.4 3 0.263～0.274 19 13.0～13.2 28 19.5～19.7 2 0.275～0.287 18 13.3～13.4 27 19.8～19.9 1 0.288～0.299 17 13.5～13.7 26 ≥20.0 0 0.300～0.312 16 13.8～13.9 25 0.313～0.324 15 8 发酵品质分级判定 青贮饲料发酵品质按表2分级。 表2 青贮饲料发酵品质分级标准 发酵品质 分值 优质 80分≤X≤100分 中等 60分≤X＜80分 劣质 0分≤X＜60分 3 DB22/T 2780—2017 AA 附 录 A （规范性附录） 氨态氮含量的测定方法 A.1 试剂 A.1.1 硼酸缓冲液（pH9.5） 0.2 mol/L 的硼酸钠溶液和 0.1 mol/L的氢氧化钠溶液按体积 4:1 比例混合后，并将pH值调节至 9.5。 A.1.2 2%硼酸乙醇溶液 将 20 g硼酸（分析纯）溶于 800 mL 无水乙醇（分析纯）后，用蒸馏水定容至 1 L。 A.1.3 0.01 mol/L盐酸溶液 配制 0.01 mol/L 盐酸溶液，并用 0.01 mol/L 标准氢氧化钠溶液对其标定。 A.1.4 A.2 甲基红溴甲酚绿混合指示剂 测定步骤 取青贮浸提液 2 mL和硼酸缓冲液 10 mL加入凯氏定氮蒸馏装置。向三角瓶内加入 2% 硼酸乙醇溶 液5 mL和 3 滴～4 滴甲基红溴甲酚绿混合指示剂后，将三角瓶接入凯氏定氮装置的冷却管处，要求冷 却管前端进入三角瓶液面下。蒸馏 7 min后，将冷却管离开液面，再蒸馏 2 min（若蒸馏液不满 50 mL 时，应使蒸馏液达到 50 mL为止）。蒸馏结束后，用 0.01 mol/L 标准盐酸溶液对蒸馏液进行滴定。 A.3 计算方法 氨态氮含量按公式A.1进行计算。 1 V %   0.14  F  B   2 180  A W 100  100 ..................... (A.1) 1000 A 式中： V ——氨态氮含量，单位为鲜样的质量百分比（%）； F ——用0.01 mol/L氢氧化钠标准溶液滴定0.01 mol/L盐酸滴定液的滴定系数； B ——滴定值，单位为毫升（mL）； A ——青贮饲料样品质量，A = 20，单位为克（g）； W ——青贮饲料的水分含量，单位为百分比（%）。 B 4 DB22/T 2780—2017 附 录 B （规范性附录） 挥发性脂肪酸含量的测定方法 B.1 试剂 B.1.1 B.1.2 高氯酸，色谱纯。 超纯水。 B.2 高效液相色谱（HPLC）条件设定 B.2.1 色谱柱 Shodex Rspak KC-811 S-DVB gel Column 30 mm × 8 mm。 B.2.2 检测器 紫外检测器，检测波长 210 nm。 B.2.3 流动相 3 mmol 高氯酸。 B.2.4 检测条件 流速为 1 mL/min。柱温为 50 ℃。检测波长为 210 nm。进样量为 5 μL。 B.3 测定步骤 B.3.1 样品制备 将青贮浸提液 4500 r/min 离心 15 min，将离心后上