ICS 65.020.30 B 41 DB51 四 川 省 地 方 标 准 DB51/T 1850—2014 猪圆环病毒病诊断技术规范 2014 - 09 - 19 发布 四川省质量技术监督局 2014 - 10 - 01 实施 发 布 DB51/T 1850—2014 目 次 前 言 ............................................................................... II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 临床症状及病理学变化 .............................................................. 1 5 实验室诊断 ........................................................................ 2 6 结果判定 .......................................................................... 3 I DB51/T 1850—2014 前 言 本标准附录A为资料性附录。 本标准由四川省农业厅提出并归口。 本标准由四川省质量技术监督局批准。 本标准由四川省动物疫病预防控制中心负责起草。 本标准主要起草人：陈斌、陈弟诗、李金海、裴超信、邢坤、张毅、潘梦、张睿、韩帅、张代芬、 王英。 II DB51/T 1850—2014 猪圆环病毒病诊断技术规范 1 范围 本规范规定了猪圆环病毒病的临床症状及病理学变化、实验室诊断技术要求。 本规范适用于对猪圆环病毒病开展监测、诊断和流行病学调查。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 21674 猪圆环病毒聚合酶链反应试验方法 SN/T 2708 猪圆环病毒病检疫技术规范 《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》（2005农业部公告第503号） 《兽医实验室生物安全技术管理规范》（2003农业部公告第302号） 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 3.1 猪圆环病毒（Porcine circovirus,PCV） 属于圆环病毒科圆环病毒属成员，无囊膜，含有共价闭合的单股环状负链DNA，是迄今发现的一种 最小的动物病毒。分为对猪无致病性的PCV1型和对猪有致病性的PCV2型。 3.2 猪圆环病毒病 以圆环病毒2型为主要病原，主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）和猪皮炎与肾病综合征 （PDNS），以及繁殖障碍、先天性振颤(CT)、猪呼吸道疾病综合征（PRDC）、增生性坏死性肺炎（PNP）、 肠炎等病症，是引起猪免疫障碍的重要传染病。 4 临床症状及病理学变化 4.1 4.1.1 临床症状 断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS） 主要发生在5周～16周龄的猪，断奶前生长发育良好，断奶后同窝或不同窝仔猪有被毛粗糙，发育 迟缓，进行性消瘦；有时出现呼吸道症状，如呼吸困难、咳嗽、喘气；有时腹泻；有时出现贫血皮肤苍 白或可视黏膜黄疸；有时出现突然死亡。 1 DB51/T 1850—2014 4.1.2 猪皮炎与肾病综合征(PDNS) 多发生于12周～14周龄架子猪，皮肤初期潮红出现红色斑点或丘疹，后发展为圆形或不规则隆起， 呈红色、紫红色，继而由中心部位变黑并逐渐扩展到整个丘疹形成黑色结痂。皮肤病主要发生在背部、 臀部和四肢，并可延伸至下腹、腰部和耳部，严重的可覆盖全身各处。轻者体温正常，常自行康复，严 重者表现厌食、跛行、发热、呼吸困难、结膜炎，腹泻，消瘦等症状。 4.1.3 先天性振颤（CT） 仔猪出生或几小时后出现震颤，共济失调。同一窝仔猪中有个别发病，也有全部发病，但颤抖轻重 程度各有差异。躺卧或睡眠时颤抖较轻或停止，外部刺激如突然声响或寒冷等能引发或增强颤抖。 4.1.4 繁殖障碍 妊娠后期流产和死胎；母猪怀孕不同阶段出现流产、早产，产出木乃伊胎或弱仔；哺乳母猪在仔猪 断奶后长时间不发情，或虽然发情，却屡配不孕。 4.2 病理学诊断 4.2.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS） 浅表淋巴结异常肿胀，特别是腹股沟浅淋巴结，切面为均匀的白色；肺部有灰褐色炎症和肿胀，呈 弥漫性病变，比重增加，质地坚硬或似橡皮；肝脏肝变硬、发暗，或者呈浅黄到橘黄色外观，萎缩，肝 小叶间结缔组织增生；肾脏水肿，苍白，被膜下有坏死灶；脾脏显著肿大；胰、小肠和结肠常有肿大及 坏死病变。 4.2.2 皮炎肾衰综合症(PDNS) 肾脏肿胀、苍白及肾皮质有大面积出血点或斑块；全身坏死性脉管炎，坏死性及纤维素性肾小球肾 炎；淋巴结水肿，切面苍白。 4.2.3 繁殖障碍 胎儿明显心肌肥大，心肌损伤，表现为大面积纤维组织增生或坏死性心肌炎。 5 实验室诊断 5.1 样品采集 无菌采集病猪的扁桃体、全血2mL-4mL或新鲜病死猪的扁桃体、淋巴结、脾脏、肺脏等组织样品，4 ℃保存，立即送检。送检猪全血，分离血清，血清应新鲜、透明、不溶血、无污染，密装于灭菌1.5mL 离心管内，4℃或-20℃保存待检。 5.2 5.2.1 病原学检测 聚合酶链式反应检测（PCR） 对病猪的扁桃体、全血或新鲜病死猪的扁桃体、淋巴结、脾脏、肺脏等组织样品进行检测，具体操 作方法按GB/T 21674相关规定执行。 5.2.2 2 实时定量荧光 PCR 检测（real-time PCR） DB51/T 1850—2014 对病猪的扁桃体、全血或新鲜病死猪的扁桃体、淋巴结、脾脏、肺脏等组织样品进行检测，具体操 作方法按SN/T 2708Z中4.4的相关规定执行。 5.3 抗体检测 对血清样品进行酶联免疫吸附试验（ELISA）检测抗体，具体操作方法参见附录A。 6 6.1 结果判定 疑似病例 猪只临床症状符合4.1中前3项任意一项者，病理变化符合4.2任意一项；或猪只临床症状符合4.1.4 者，胎儿病变符合4.2.3者，可判定为猪圆环病毒病疑似病例。 6.2 确诊病例 猪圆环病毒病疑似病例，经病原学任意一项检测为阳性，或者非免疫猪群抗体检测为阳性，可判定 为猪圆环病毒病。 _________________________________ 3 DB51/T 1850—2014