ICS 65.020.99 CCS B41 4117 驻马店市 地方 标准 DB 4117/T 169.27—2021 代替 DB4117/T 169.27 -2017、DB4117/T 169.29 -2017 动物疫病流行病学调查技术规范 第27部分：动物球虫病 2021 - 09-29发布 2021 - 10- 29实施 驻马店市市场监督管理局 发布 DB 4117/T 169.27 —2021 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替DB4117/T 169.27 -2018《动物疫病流行病学调查技术规范 第27部分：鸡球虫病》、 DB4117/T 169.29 -2018《动物疫病流行病学调查技术规范 第29部分：兔球虫病》 ，与DB4117/T 169.27-2018、DB4117/T 169.29 -2018相比，除编辑性修改外，主要技术变化如下： —— 细化和完善了紧急流行病学调查的启动条件、步骤、内容、结果分析与报告及技术要求； —— 对兔球虫、鸡球虫相同部分进行了合并，增加了家畜（牛、羊、猪等）动物； —— 修改了原标准 4.3、4.2，修订内容见 5.2。 —— 修订了动物球虫病诊断结果判定； —— 修改了规范性附录； —— 增加了生物安全个人防护内容； —— 增加了裂殖子 /裂殖体检查部分，增加了对兔肝脏、鸭、鹅肾脏的检查； 本文件由驻马店市畜牧局提出。 本文件由驻马店市畜牧兽医标准 化技术委员会归口。 本文件起草单位：驻马店市动物疫病预防控制中心、焦作市畜产品质量安全监测中心、济源市畜牧 技术推广站、 正阳县农业综合行政执法大队、 周口市川汇区动物卫生监督所 、驻马店市 驿城区动物卫生 监督所、开封市动物卫生监督所、南阳市内乡县动物卫生监督所、 西华县动物检疫站、 鲁山县畜牧局、 汝南县动物卫生监督所、 遂平县动物卫生监督所、新蔡县农业综合行政执法大队、 平舆县家畜家禽改良 站、济源市畜产品质量监测检验中心、 滑县动物卫生监督所 、滑县农业农村局、正阳县兽药饲料质量检 验监测中心。 本文件主要起草人：李永彬、 关婷婷、马超越、 左英芳 、陈利霞 、成林林 、黄树林、刘克超、 李华珍 、赵强 、杨静 、于佳楠、杜新娜、侯晓阳、司晓楠 、王梦、左红新、尚雅君、张健、段红玉、 高飞、赵亮、张振宇、吴莹丽、陈会芳 、孙政豪。 本文件的历次版本发布情况为： —DB4117/T 169. 27-2017和DB4117/T 169. 29-2017。 DB 4117/T 169.27 —2021 1 动物疫病流行病学调查技术规范 第27部分：动物球虫病 1 范围 本文件规定了现场调查生物安全防护、常规流行病学调查、紧急流行病学调查等技术要求。 本文件适用于动物球虫病的流行病学调查。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文 件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 18647 动物球虫病诊断技术 NY/T 541 动物疫病实验室检验采样方法 DB4117/T 217.1 动物疫病紧急流行病学调查技术指南 第1部分：总则 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 现场调查生物安全防护 调查采样人员防护 4.1 4.1.1 个人防护穿戴顺序。依次是口罩、工作帽、防护服、防护眼睛、防护靴、双层手套，将手套套 在防护服袖口外面。 4.1.2 个人防护脱掉顺序。依次是脱第一层手套、摘下防护眼睛、脱防护服、脱防护靴、摘帽子、脱 一只手套、摘口罩、脱掉另一只手套。 安全防护要求 4.2 疑似炭疽时，不得解剖。 遵守生物安全操作的相关规定，防止人畜共患病感染， 做好环境消毒及动 物活组织的无害化处理。 调查采样人员在开展流行病学调查过程中不应 造成流行病学调查点之间交叉感 染。 5 诊断指标 临床症状 5.1 根据发病临床特征， 球虫病可分为急性型和慢性型。 DB 4117/T 169.27 —2021 2 急性型多发生于幼龄动物，病程初期表现为精神沉郁，嗜睡，被毛粗乱，食欲下降，腹泻。病程后 期出现运动失调，食欲废绝，排出带血水样稀便 ，甚至是血便，呈恶臭味，可视黏膜贫血、苍白，身体 消瘦，甚至失重，最后因脱水、衰竭而死。慢性型多见于大龄动物，无明显症状，主要表现为厌食，间 歇性下痢，逐渐消瘦，生产性能下降等。 有以上临床症状者，怀疑为球虫病，确诊需要进一步进行病原或病理检查。 病理变化 5.2 5.2.1 对疑为球虫感染致死或将死亡的动物进行解剖，观察病变情况。 5.2.2 主要检查球虫寄生部位（器官）的病变。大多数的球虫寄生于肠上皮细胞，若肠道明显肿大、 胀气或变形，肠浆膜面出现针尖大小、颜色为鲜红色、褐色或白色的斑点或斑块或结节；肠内容物充满 血凝块、脱落的上皮细胞、纤维素样物、黏液等，呈暗红色、橙黄色或乳白色，多为稀薄状；肠黏膜增 厚，有坏死的病灶等，可疑为球虫病，进一步做裂殖体或卵囊检查。 5.2.3 对兔，还应检查肝脏；对鸭、鹅，还应检查肾脏；若这些脏器有灰白色的斑点或斑块，可疑为 球虫病，进一步做裂殖子、裂殖体或卵囊检查。 裂殖子/裂殖体检查 5.3 5.3.1 取病变明显肠道，纵向剪开，用磷酸盐缓冲液轻轻洗去黏膜表层的杂物，刮取少许黏膜；对兔 或鸭、鹅，还应分别刮取肝脏或肾脏灰白色的斑点或斑块。 5.3.2 将刮取物放在载玻片上，滴 1～2滴磷酸盐缓冲液，加盖玻片，置于显微镜载物台上。 5.3.3 在高倍镜下观察，如见有大量球形像剥了皮的橘子似的裂殖体（直径大多为 10μm～50μm）和 香蕉形或月牙形的裂殖子（大小大多为 5μm～8μm×2μm～3μm），判为球虫感染。 卵囊检查 5.4 5.4.1 将病变明显的肠道，纵向剪开，取少量内容物，放在载玻片上，滴 1～2滴磷酸盐缓冲液，加盖 玻片，轻轻将内容物压散，置显微镜下检查，若见大量球虫卵囊，判为球虫感染。 5.4.2 或取有灰白色斑点或斑块的肠道，纵向剪开，用磷酸盐缓冲液轻轻洗去黏膜表层的杂物，刮取 少许有灰白色班的黏膜，放在载玻片，滴 1～2滴磷酸盐缓冲液，加盖玻片，轻轻将黏膜内容物压散 ， 置显微镜下检查，若见大量球虫卵囊，判为球虫感染。 5.4.3 对疑为兔或鸭、鹅的球虫病，从有灰白色斑点或斑块的肝脏或肾脏上，剪取少量病变组织，放 在研钵内，加适量磷酸盐缓冲液，充分研磨。取 1滴研磨液在载玻片上，加盖玻片，置显微镜下检查， 若见大量球虫卵囊，判为球虫感染。 实验室检测 5.5 5.5.1 样品采集 疑似动物球虫病时 ，应立即按照 GB/T 18647 和NY/T 541的要求 采集病料并填写样品采集登记表符 合本标准 附录A的规定， 进行实验室诊断 。 5.5.2 病原学检测 5.5.2.1 粪便内病原检查 应用定性和定量的方法检测畜禽粪便内病原，具体可按照 GB/T 18647规定执行。 5.5.2.2 肠内容物或肠组织或肝脏和肾脏等组织病原检查