ICS07.100 CCSB WSWXH 新疆维吾尔自治区微生物学会团体标准 T/WSWXH010—2024 棉花耐盐防病促生菌种衣剂生产技术规程 Technicalregulationsfortheproductionofsalt-tolerant,disease-resistantand growth-promotingcottonseedcoatingagent 2024-09-11发布 2024-09-12实施 新疆维吾尔自治区微生物学会  发布 全国团体标准信息平台 T/WSWXH010—2024 I前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由新疆农业科学院微生物应用研究所提出。 本文件由新疆维吾尔自治区微生物学会归口。 本文件起草单位：新疆农业科学院微生物应用研究所。 本文件主要起草人：史应武、杨红梅、楚敏、高雁、霍向东、曾军、林青、詹发强、包慧芳、王宁、 杨蓉、牛新湘、娄恺。 全国团体标准信息平台 T/WSWXH010—2024 1棉花耐盐防病促生菌种衣剂生产技术规程 1范围 本标准规定了耐盐防病促生菌种衣剂生产中涉及的术语和定义、生产环境、生产车间、菌种、发酵 增殖、后处理、包装、储运及质量检验等技术环节作出要求。 本标准适用于耐盐防病促生菌种衣剂产品生产（或执行）。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB3095环境空气质量标准 GB3838地表水质量标准 GB20287农用微生物菌剂 NY/T883农用微生物菌剂生产技术规程 DB23/T823种子包衣操作技术规程 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 耐盐防病促生细菌salt-tolerant,disease-proofandgrowth-promotingbacteria 具有提高棉花苗期对盐耐受性，同时兼具防治棉花土传真菌和细菌病害的一种或几种细菌。 3.2 微生物菌剂microbialagents 一种或一种以上目的（或者用途）微生物经工业化生产增殖后直接使用，或经浓缩、载体吸附而制 成的活菌制品。 3.3 生物种衣剂biologicalseedcoatingagent 生物种衣剂是利用有益的拮抗菌与病原菌之间的拮抗原理，将拮抗菌作为生物活性成分，辅以成膜 剂和着色剂等非活性成分混合而创制出的一种新型种衣剂。 3.4 种子包衣seedcoating 种子包衣是指利用粘着剂或成膜剂，用特定的种子包衣机，将杀菌剂、杀虫剂、微肥、植物生长调 节剂、着色剂或填充剂等非种子材料，包裹在种子外面，以达到种子成球形或者基本保持原有形状，提 高抗逆性、抗病性，加快发芽，促进成苗，增加产量，提高质量的一项种子技术。种衣剂能迅速固化成 膜，因而不易脱落。 4生产环境及生产车间要求 4.1生产环境 厂区空气质量达到大气环境质量标准GB3095中Ⅱ类标准要求； 发酵用水达到地表水质量标准GB3838中Ⅲ类水质要求，冷却水及其他用水达到标准中Ⅳ类水质要 求。 4.2生产车间 全国团体标准信息平台 T/WSWXH010—2024 2发酵车间与吸附等后处理车间距离适当，相对隔离，有密闭且可以灭菌的传输通道； 菌种的储藏间、无菌操作间与生产车间相对隔离； 发酵等生产关键性车间采用双路供电或备用一套发电机； 建立定期用消毒剂进行生产设备和环境消毒的车间环境卫生制度。 5生产技术流程 耐盐防病促生菌剂的生产按照NY/T883进行，一般生产技术环节见附录A。 5.1菌种 5.1.1原种 原种是耐盐防病促生菌剂生产用菌种的母种，对原种的要求如下： 有菌种鉴定报告和效果应用证明； 菌种的企业编号、来源等信息。 5.1.2菌种的保存和管理 采用合适的方式保存菌种，确保无杂菌污染，菌种不退化。应选用一种以上适宜的方法保藏，常见 菌种类型及相应保藏方式见附录B； 分类存放，定期检查； 建立菌种档案。 5.1.3菌种质量控制 在生产之前，应对所用菌种进行检查，确认其菌落形态、细胞形态、芽孢大小、位置、形状和耐盐 防病促生性能没有发生退化。出现污染或退化的菌种不能作为生产用菌种，需进行5.1.4或5.1.5操作。 5.1.4菌种的纯化 菌种不纯时，应进行纯化。可采用平板划线分离法或稀释分离法，得到纯菌种。必要时可采用显微 操作单细胞分离器进行菌种分离纯化。对纯化的菌种应进行生产性能的检查。 5.1.5菌种的复壮 菌种发生下列现象之一，应进行菌种复壮： 菌体形态及菌落形态发生变化； 代谢活性降低，发酵周期改变； 重要功能性物质的产生能力下降； 其他重要特性的退化或丧失； 菌种复壮方法：回接到原宿主或原分离环境传代培养，重新分离该菌种。 5.2发酵增殖 5.2.1种子扩培 原菌种应连续转接活化至生长旺盛后方可应用。 种子扩培过程包括试管斜面菌种、摇瓶（或固体种子培养瓶）、种子罐发酵（或种子固体发酵）培 养三个阶段，操作过程要保证菌种不被污染、生长旺盛。 5.2.2培养基 培养基重要原料应满足一定的质量要求，包括成分、含量、有效期以及产地等。对新使用的发酵原 料需经摇瓶试验或小型发酵罐试验后方可用于发酵生产。 5.2.2.1种子培养基 种子培养基要保证菌种生长延滞期短，生长旺盛。原料应使用易被菌体吸收利用的碳、氮源，且氮 源比例较高，营养丰富完全，有较强的pH缓冲能力。最后一级种子培养基主要成分应接近发酵培养基。 全国团体标准信息平台