ICS 71.040.40 CCS C53 厦门市 供厦食品 安全团体标准 T/XMSSAL 0141—2024 T/XMSSAL 供厦标准 海产品中 9种脂溶性藻毒素的 液相色谱 -串联质谱测定方法 Determination of nine Lipophilic Algae Toxins in marine products by liquid chromatography -tandem mass spectrometry for Xiamen 2025-01-24发布 2025-01-24实施 厦门市食品安全工作联合会 发布 全国团体标准信息平台 T/XMSSAL 0141 —2024 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由 厦门市食品安全工作联合会 提出并归口。 本文件起草单位： 厦门市食品药品质量检验研究院、厦门海关技术中心、厦门市产品质量监督检验 院、厦门市食品安全工作联合会、 福建省鑫龙安检测技术有限公司、厦门市标准化研究院。 本文件主要起草人： 施冰、黄碧慧、黄山、李梓、林志香、徐敦明、林伟琦、 孙佳、李振良、许晓 春。 全国团体标准信息平台 T/XMSSAL 0141 —2024 1 供厦标准 海产品中 9种脂溶性藻毒素的液相色谱 -串联质谱测定 方法 1 范围 本文件第一篇规定了海产品中 7种脂溶性藻毒素的液相色谱 -串联质谱测定方法。 本文件第一篇适用于双壳类、腹足类、甲壳类 等海产品 中扇贝毒素 PTX2、原多甲藻酸毒素 AZA1、 AZA2、AZA3、环亚胺毒素 GYM、短裸甲藻毒素 BTX2、BTX3的测定。 本文件第 二篇规定了海产品中 2种脂溶性藻毒素的液相色谱 -串联质谱测定方法。 本文件第 二篇适用于双壳类、腹足类、甲壳类等海产品中虾夷扇贝毒素 YTX、hYTX的测定。 第一篇 海产品中 7种脂溶性藻毒素的测定 2 原理 试样经乙酸乙酯 提取，固相萃取净化， 采用液相色谱串联质谱测定，外标法定量。 3 试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 乙酸乙酯（ CH 3COOC 2H5）：色谱纯。 3.1.2 乙腈（ CH 3CN)：色谱纯。 3.1.3 甲醇（ CH 3OH）：色谱纯。 3.1.4 甲酸（ HCOOH）。 3.1.5 乙酸铵（ CH 3CO 2NH 4）。 3.2 试剂配制 3.2.1 甲醇水溶液（ 35%）：取 35 mL甲醇，用水稀释至 100 mL。 3.2.2 甲酸水溶液（ 0.1%）：取 1 mL甲酸，用水稀释至 1000 mL。 3.2.3 流动相 A（10 mmol/L 乙酸铵 -0.1%甲酸水溶液 ):称取 0.7708 g乙酸铵，用 0.1%甲酸溶液溶解并 稀释至 1000 mL，过微孔滤膜（ 3.5.2）。 3.2.4 流动相 B（0.1% 甲酸乙腈溶液）：取 1 mL甲酸，用乙腈稀释至 1000 mL, 过微孔滤膜（ 3.5.3）。 3.3 标准品 原多甲藻酸毒素 AZA1、AZA2、AZA3、环亚胺毒素 GYM、扇贝毒素 PTX2、短裸甲藻毒素 BTX2、 BTX3标准品， 避光保存于 -18℃以下。标准品相关信息参见附录 A。 3.4 标准溶液配制 全国团体标准信息平台 T/XMSSAL 0141 —2024 2 3.4.1 标准储备溶液：用甲醇分别溶解短裸甲藻毒素 BTX2和BTX3标准品 100 μg，转移至 5 mL容 量瓶中 ,甲醇稀释并定容，配制 BTX2、BTX3单标储备溶液（ 19.0 μg/mL ）。分别移取 500 μL AZA1 、 AZA2、AZA3、GYM、PTX2标准溶液于５ mL容量瓶中 ,用甲醇稀释并定容 ，配制成单标储备溶液 ，浓 度分别为 0.130、0.122、0.118、0.250、0.440 μg/mL 。-18℃及以下避光保存。 3.4.2 混合标准溶液：分别移取 BTX2、BTX3标准储备溶液 1.00 mL，AZA1、AZA2、AZA3、GYM、 PTX2标准储备溶液 1.25 mL于25 mL容量瓶中 ，用甲醇稀释并定容 ，配制成混合标准溶液。 AZA1、 AZA 2、AZA3、GYM、PTX2、BTX2、BTX3浓度分别为 6.5、6.1、5.9、12.5、22.0、760、760 ng/mL。 -18℃及以下避光保存。 3.4.3 混合标准系列工作溶液：分别移取 1.00、2.00、3.00、4.00 mL的混合标准溶液于 5 mL容量瓶 中，用甲醇稀释并定容 ,配制成混合标准系列工作溶液。临用时配制。 3.4.4 基质匹配标准工作溶液：选择与被测样品性质相同或相似的空白样品，按照 6.1～6.2进行前处 理，得到空白基质溶液。移取相应的混合标准溶液，用空白基质溶液稀释成基质匹配标准工作溶液。 3.5 材料 3.5.1 固相萃取柱： Bond Elut Plexa （3 mL/60 mg ）,或性能相当者。 3.5.2 微孔滤膜： 47mm×0.22 µ m，水相。 3.5.3 微孔滤膜： 47mm×0.22 µ m，有机相。 3.5.4 微孔滤膜： 13mm×0.22 µ m，有机相。 4 仪器和设备 4.1.1 液相色谱 -串联质谱仪：配电喷雾离子源。 4.1.2 分析天平：感量 0.01 g和0.01 mg。 4.1.3 组织捣碎机。 4.1.4 高速均质器：转速≥ 15 000 r/min 。 4.1.5 超声波清洗器。 4.1.6 高速冷冻离心机。 4.1.7 氮吹浓缩仪。 4.1.8 固相萃取装置。 4.1.9 涡旋混匀器。 5 试样制备 采取足够的样品个数，去壳，去除泥沙及其他异物， 取可食部分达 到200 g以上，用组织捣碎机绞 碎后，装入样品瓶中或样品袋中，测试样和备用样分别存放，备用样于 -18℃及以下保存。 6 分析步骤 6.1 试样提取 称取 2 g试样（精确至 0.01 g）于 50 mL具塞离心管中，加入 10 mL乙酸乙酯，高速均质器 15 000 r/min均质 2 min，超声 10 min，于高速冷冻离心机 4℃， 12 000 r/min 离心 3 min，上清液转移至 20 mL 容量瓶中。加入 8 mL乙酸乙酯，重复以上操作一次，合并上清液于容量瓶中，乙酸乙酯定容，混匀。 移取 10.0 mL提取液于试管中， 40℃氮气吹干，加入 35%甲醇水溶液 2 mL，涡旋混匀，待净化。 全国团体标准信息平台